Coombs-testi

Mikä on Coombs-testi?

Coombs-testiä käytetään punaisten verisolujen (erytrosyyttien) vasta-aineiden havaitsemiseen. Vasta-aineiden määrittämiseen käytetään ns. Coombs-seerumia, joka saadaan kanien seerumista ja herkistetään ihmisen vasta-aineille.
Testiä käytetään, jos hemolyyttinen anemia, reesuksen yhteensopimattomuus tai vähän ennen verensiirron epäillään. Hemolyyttinen anemia on anemian muoto ja reesuksen yhteensopimattomuus kuvaa veriryhmän yhteensopimattomuutta.
Coombs-testiä on kahta eri tyyppiä, suora ja epäsuora testi eroavat indikaation ja suorituksen suhteen.

Coombs-testin syyt

Suoraa Coombs-testiä käytetään, jos epäillään hemolyyttistä anemiaa. Hemolyyttinen anemia kuvaa anemiaa, jossa verisolut hajoavat ennenaikaisesti vaurioiden vuoksi.
Autoimmuunisairauksissa, kuten systeemisessä lupus erythematosuksessa, nivelreumassa tai kroonisessa imusolkulekemiassa, muodostuu vasta-aineita, jotka kohdistuvat kehon omiin verisoluihin (ns. Punasolut). Vasta-aineiden sitoutuminen johtaa verisolujen varhaiseen hajoamiseen tai verisolujen paakkuuntumiseen verisuonissa. Nämä molemmat johtavat hemoglobiiniarvon laskuun.

Toinen indikaatti suoralle Coombs-testille on haemolyticus neonatorum -tauti, jolloin reesusfaktorin vastaisia ​​vasta-aineita muodostuu reesusnegatiivisen äidin vartaloon. Jos syntymätön lapsi on reesuspositiivista, äidin vasta-aineet voivat päästä sikiön verenkiertoon ja aloittaa siellä olevien verisolujen lisääntyneen hajoamisen. Vastasyntyneet erottuvat vakavasta anemiasta ja keltaisuudesta.

Coombs-testiä käytetään säännöllisesti verensiirtolääketieteessä. Sitä käytetään veriryhmien määrittämiseen ennen verensiirtoa (sängytesti), jossa pieni verinäyte sekoitetaan erilaisilla seerumeilla veriryhmistä A, B, AB ja 0. Jos veri pysyy nestemäisenä, potilaan veri on yhteensopiva vastaavan veriryhmän kanssa. Verensiirto voidaan suorittaa.

Epäsuoraa Coombs-testiä voidaan käyttää myös etsimään vapaita vasta-aineita potilaan kehosta (vasta-ainehaun testi), esim. äitiystarkastusten aikana valmistellen verensiirtoon onkologisilla potilailla tai ihmisillä, jotka ovat jo saaneet verensiirron.

Lue kaikki aiheesta täältä: Rh-intoleranssi.

Valmistelu

Coombs-testiä valmisteltaessa valmistetaan ensin seerumit vasta-aineilla, jotka on testattava. Ne täytetään eri koeputkiin tai levitetään testikorteille.

Jokapäiväisessä kliinisessä käytännössä esim. sängyn testillä on jo valmiita testikortteja, joita voidaan käyttää välittömästi. Seuraavaksi potilaasta otetaan verta ja valmistellaan testiä varten. Riippuen siitä, minkä tyyppinen Coombs-testi suoritetaan, tarvitaan potilaan verisolut tai seerumi (veren nestemäinen osa).

Sarja

Jos suoritetaan suora Coombs-testi, punasolut suodatetaan potilaan verestä. On testattava, onko niissä IgG-tyyppisiä vasta-aineita, jotka aiheuttavat kehossa hemolyyttistä anemiaa tai veriryhmien yhteensopimattomuutta. Coombs-seerumi sisältää vasta-aineita ihmisen IgG-vasta-aineita vastaan. Seosta kuumennetaan (inkuboidaan) pitkään. Jos punasoluissa on vasta-aineita, ne rypistyvät ja testi muuttuu positiiviseksi.

Epäsuora Coombs-testi koostuu kahdesta osasta. Tarkoitus on selvittää vasta-aineet, jotka ovat vapaita veressä eivätkä sitoutu verisoluihin.
Tällä kertaa nestemäinen osa (seerumi) suodatetaan potilaan verestä. Ensin punasolut lisätään seerumiin testiä varten. Jos seerumissa on vapaita vasta-aineita, ne sitoutuvat punasoluihin. Tämä reaktio ei ole näkyvissä. Vain toisessa vaiheessa, kuten suorassa Coombs-testissä, Coombs-seerumi, johon lisätään ja lämmitetään ihmisen vasta-aineita vasta-aineita. Tässäkin tapauksessa ratkaisu rypistyy, jos tulos on positiivinen.

Arviointi

Jos vasta-aineet yhdistetään sopivan Cooms-seerumin kanssa, seerumin vasta-aineet (veren nestemäinen osa) sitoutuvat potilaan vasta-aineisiin. Vasta-aineet ovat Y-muotoisia, mikä tarkoittaa, että ne voivat aina sitoa kahta sitoutumispartneria ja siten silloittaa punasoluja toisiinsa. Muodostuu suuri verisolujen kertymä. Nämä kohoumat tulevat näkyviksi - veri agglutinoituu (kohoumia) ja testi on positiivinen.
Jos potilaalla ei ole sopivia vasta-aineita, seerumi pysyy nestemäisenä. Et näe mitään muutosta - testi on negatiivinen.

Mitkä ovat vaihtoehdot?

Vaihtoehto Coombs-testille on immunologinen ELISA-menetelmä (entsyymisidottu immunosorbenttimääritys), jossa tietyt vasta-aineet on merkitty entsyymillä. Tämä vasta-aine lisätään koeliuokseen. Jos leimatut vasta-aineet reagoivat testiliuoksessa olevien vasta-aineiden kanssa, sitoutunut entsyymi aktivoituu ja tuottaa väriainetta. Vastaavat koeputket muuttavat väriä - testi on positiivinen.

ELISA-menetelmän lisäksi on olemassa myös WESTERN-blotti, jota käytetään usein varmennuskokeena positiiviselle ELISA-testille.